單克隆抗體/雜交瘤細(xì)胞定制服務(wù)
雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時(shí)保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞(如小鼠B淋巴細(xì)胞)和具有永生功能的腫瘤細(xì)胞(如小鼠骨髓瘤細(xì)胞)。被特異性抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞( B淋巴細(xì)胞)的主要特征是它的抗體能夠分泌產(chǎn)生結(jié)合抗原特定位置(表位)的抗體,但其自身不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，具有永生功能的腫瘤細(xì)胞(骨 髓瘤細(xì)胞)則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只賄由一個(gè)B淋巴細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力，形成同時(shí)具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。理論上，我們認(rèn)為一個(gè)免疫后的B淋巴細(xì)胞只分泌產(chǎn)生一種抗體，而一個(gè)雜交瘤細(xì)胞只包含一個(gè)B淋巴細(xì)胞,所以增值后的雜交瘤細(xì)胞均來自一各克隆，因此產(chǎn)生的抗體就是單克隆抗體。
本公司提供quanfangwei的抗原分析服務(wù)，為海一位客戶精心打造的方案， 全面評(píng)估實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)，提出zui合理的實(shí)驗(yàn)建議。無論是采用多肽設(shè)計(jì)合成，還是原真核蛋白表達(dá)目的抗原，我們yiliu的抗體制備技術(shù)團(tuán)隊(duì)都會(huì)深入每個(gè)實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)，憑借多年的試驗(yàn)項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)，有效規(guī)避實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn),切實(shí)提高成功概率。免疫受試動(dòng)物，均為SPF級(jí)飼養(yǎng)環(huán)境培育，遺傳背景清楚,免疫應(yīng)答迅速,抗體的專-性與結(jié)合力均為同行內(nèi)lingxianzhe。實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員全部具有研究生以上學(xué)歷，全部熟稔大規(guī)模抗體雜交瘤細(xì)胞篩選技術(shù)流程，能根據(jù)客戶的各種需求改進(jìn)制備工藝。憑借業(yè)內(nèi)lingxian的制備工藝，于同行的免疫動(dòng)物數(shù)量，我們擁有業(yè)內(nèi)最深的雜交瘤細(xì)胞群探測(cè)深度與精準(zhǔn)度，通過快速篩選，我們制備的抗體不僅能實(shí)現(xiàn)WB，ELISA等常 規(guī)實(shí)驗(yàn)需要，對(duì)于客戶需要的更高制備難度的IHC、IF、 IP等試驗(yàn),同樣可以有效檢出滿足要求的功能性雜交瘤細(xì)胞。
大鼠源單克隆抗體定制服務(wù)(Rat Monoclonal Antibody Service)
注:
●于受試動(dòng)物較為脆弱，制備工藝復(fù)雜，為防止實(shí)驗(yàn)意外，本公司大鼠單抗制備免疫數(shù)量一 般最少2
只,
●所有的大鼠單抗制備項(xiàng)目，如果由親和純化改為抗原特異性親和純化，價(jià)格增加500元;
●我方對(duì)于原真核蛋白從頭制備服務(wù)，可提供免費(fèi)的蛋白結(jié)構(gòu)分析與密碼子優(yōu)化服務(wù)。
●以上價(jià)格均為目錄報(bào)價(jià),實(shí)際價(jià)格以項(xiàng)目實(shí)際為準(zhǔn)
經(jīng)典案例(Rat Monoclonal Antibody Service)客戶:提供蛋白抗原質(zhì)粒\蛋白信息
制備流程:
1)抗原制備\質(zhì)粒表達(dá)蛋白純化多肽設(shè)計(jì)合成及交聯(lián)
2)免疫小鼠:兔疫LOU/c大鼠2只
3) ELISAWestern- blot試驗(yàn)監(jiān)控小鼠血清中的抗體效價(jià)和特異性，根據(jù)EL ISA和WB檢測(cè)，篩選大鼠
4)細(xì)胞融合
5)陽性篩選:對(duì)雜交瘤上清進(jìn)行EL ISA檢測(cè)，篩選出抗體陽性的雜交瘤細(xì)胞克隆
6)亞克隆:陽性克隆通過有限稀釋法進(jìn)行亞克隆，提供單克隆上清給客戶檢測(cè)
7)腹水制備:采用大鼠腹腔接種法進(jìn)行雜交瘤培養(yǎng)物的腹水生產(chǎn)
8)抗體純化:純化2株單克隆雜交瘤細(xì)胞分泌抗體交付產(chǎn)品(每種抗原、2只大鼠一共的)
1) 2~3株針對(duì)免疫原特異性的單克隆雜交瘤細(xì)胞株
2)每個(gè)細(xì)胞株各提供10ml (1mg/ml) 純化的抗體，Elisa效價(jià)應(yīng)至少1:50,000以 上; WB內(nèi)源檢測(cè)陽性
3)剩余的抗原,完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告制備時(shí)間: 3~6個(gè)月