產(chǎn)品概述

Thermo Scientific? NAb? 蛋白 A Plus 離心試劑盒便于對(duì)各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。固定化蛋白樹脂的每個(gè)預(yù)裝微量離心柱可從 0.5-2 mL 血清或其他樣品中快速純化 ≥34 mg 人 IgG。每個(gè)試劑盒都包括可用于純化至少兩份抗體樣品的緩沖液和簡(jiǎn)化方案。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖是一種適合抗體純化的通用、高性能親和樹脂。它包含以高密度共價(jià)固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的純化天然蛋白 A。在現(xiàn)有的許多各種形式固定化蛋白 A 親和樹脂中，本產(chǎn)品具備最廣泛靈活的色譜應(yīng)用特性，能夠?qū)Σ溉閯?dòng)物血清樣品整個(gè) IgG進(jìn)行高產(chǎn)量、高純度的純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖的特點(diǎn)：

?天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 適用于從人、兔、豬、犬或貓血清中進(jìn)行多克隆 IgG 純化
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法最常用的樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 優(yōu)越的生產(chǎn)方法通過(guò)不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵固定蛋白 A，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 高容量 – Pierce 蛋白 A 瓊脂糖的這一 “Plus” 類型包含密集上樣量的固定化蛋白 A，提供大于 34 mg 人 IgG/mL 樹脂（約 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 樹脂）的結(jié)合容量

蛋白 A 是由多種金黃色葡萄球菌菌株生成的一種細(xì)胞壁組分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽，基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個(gè)高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結(jié)合位點(diǎn)，能夠與選定哺乳動(dòng)物物種的 IgG 類抗體 Fc 區(qū)相互作用。IgG 結(jié)合功能在 pH 值 8.2 時(shí)最佳，但在中性和生理緩沖液（pH 值 7.0 至 7.6）也可高效結(jié)合。

蛋白 A 是一種源自細(xì)菌的蛋白，對(duì)抗體（尤其是 IgG 類抗體）的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品（蛋白G）相比，蛋白A對(duì)兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結(jié)合力最強(qiáng)。蛋白 A 對(duì)人 IgG 也具有較高的結(jié)合力，但對(duì) IgG3 的結(jié)合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結(jié)合作用較弱，因此不推薦用于大多數(shù)包含該抗體同種型的應(yīng)用。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項(xiàng)優(yōu)勢(shì)。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過(guò)簡(jiǎn)單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白A的結(jié)合功能。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
?支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長(zhǎng)期）
?平均粒徑：45 至 165微米
?排阻極限：10,000 至 4,000,000 道爾頓
? 最大體積流速：約 1 mL/分鐘（對(duì)于 1 cm 直徑柱）
? 最大線性速度