產(chǎn)品概述：

Thermo Scientific Pierce 固定化木瓜蛋白酶由半胱氨酸-肽鏈內(nèi)切酶（木瓜蛋白酶）組成，該酶固定在微珠狀瓊脂糖樹(shù)脂上，用于從抗體中生成和純化 Fab 片段。

木瓜蛋白酶是一種從木瓜蛋白酶乳膠中分離的非特異性半胱氨酸肽鏈內(nèi)切酶，可用于廣泛的應(yīng)用。當(dāng)在存在半胱氨酸的情況下將 IgG 分子與木瓜蛋白酶共孵育時(shí)，鉸鏈區(qū)中的一個(gè)或多個(gè)肽鍵分裂，產(chǎn)生三個(gè)小片段：兩個(gè) Fab 片段和一個(gè) Fc 片段。Fc 片段可通過(guò)固定化蛋白 A 或離子交換色譜與 Fab 片段分離。

50 千道爾頓 Fc 片段通常用于確定 Fc 受體的特異性，而不受抗原結(jié)合干擾。Fab 片段在免疫組織化學(xué)研究中非常有用，因?yàn)槠谓M織穿透的能力強(qiáng)于比完整 IgG。此外，僅使用免疫球蛋白的 Fab 部分，避免了 Fc 受體的非特異性結(jié)合。

木瓜蛋白酶也可用于生成 F(ab')2 片段。為了制備 F(ab')2 片段，首先用 10 mM 半胱氨酸活化木瓜蛋白酶，然后通過(guò)凝膠過(guò)濾去除。如果木瓜蛋白酶酶切過(guò)程中不存在半胱氨酸，則可以生成 F(ab')2 片段。這些片段通常不一致，并且可能存在重現(xiàn)性問(wèn)題。

固定化木瓜蛋白酶可以在幾乎任何應(yīng)用中代替游離木瓜蛋白酶，且具有優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗鼛缀鯚o(wú)需自溶、消除了蛋白酶樣品的污染，還可以通過(guò)去除木瓜蛋白酶或控制樣品流過(guò)固定化木瓜蛋白酶來(lái)控制酶切。固定化木瓜蛋白酶還能夠更加穩(wěn)定地抵抗熱誘導(dǎo)的變性，從而延長(zhǎng)活性維持時(shí)間。ImmunoPure Fab 制備試劑盒含有固定化木瓜蛋白酶、其他必要試劑和適用于人、兔和小鼠抗體酶切的優(yōu)化方案。